戊唑醇（tebuconazole）是一种三唑类杀菌剂，由德国拜耳公司于1986年研发。戊唑醇的作用机理为抑制病原真菌合成用于构成细胞膜的麦角甾醇，可以有效防治壳针孢属菌、白粉菌属、喙孢属、柄锈菌属和核腔菌属等引起的病害。

咪鲜胺是一种广谱高效的咪唑类杀菌剂，由Boots公司于1977年研发。咪鲜胺（prochloraz）的作用机理是抑制麦角甾醇的生物合成，破坏菌体细胞膜功能，常用于治疗尾孢属、核腔菌属、喙孢属、核盘菌属、镰孢属及白粉菌、炭疽菌等引起的病害。戊唑醇·咪鲜胺的复配剂型主要为水乳剂（EW），在报道中常见于防治小麦赤霉病与香蕉黑星病。

目前关于戊唑醇与咪鲜胺同时分析方法仅见高效液相色谱法。本研究建立了气相色谱法同时测定戊唑醇·咪鲜胺水乳剂中有效成分的分析方法，该方法具有操作简单、效率高、分离效果好、准确度和精密度高等优点，适用于农药中戊唑醇与咪鲜胺的定性及定量分析。

1  实验部分

1.1  仪器与试剂

（1）仪器

Agilent 7890B型气相色谱仪（美国安捷伦公司）；色谱柱：HP-5（30 m×0.32 mm×0.25 µm）；超声波清洗机。

（2）试剂

甲醇（分析纯）；邻苯二甲酸二环己酯（内标物）；戊唑醇[≥98%，国家农药质量监督检验中心（沈阳）]、咪鲜胺（≥98%，北京勤诚亦信科技开发有限公司）；37%戊唑醇·咪鲜胺水乳剂（戊唑醇12.5%、咪鲜胺24.5%，上海绿泽生物科技有限责任公司）。

1.2  气相色谱操作条件

载气：N₂；载气流速：1.8 mL/min；进样口温度：250℃；不分流进样：1 µL；柱温：220℃，保持11 min，以10℃/min升至280℃，保持5 min；戊唑醇保留时间约7.38 min；咪鲜胺保留时间约14.65 min；内标物邻苯二甲酸二环己酯保留时间约10.25 min。

戊唑醇·咪鲜胺标样的气相色谱图

37%戊唑醇·咪鲜胺水乳剂的气相色谱图

1.3  测定步骤

（1）内标溶液的配制

称取邻苯二甲酸二环己酯2.0 g于500 mL容量瓶中，用甲醇溶解，定容，摇匀。

（2）标准溶液的配制

分别称取戊唑醇标样0.05 g、咪鲜胺标样0.10 g（精确至0.000 2 g）置于一具塞玻璃瓶中，用移液管准确加入10 mL内标溶液，摇匀。

（3）试样溶液的配制

称取戊唑醇·咪鲜胺水乳剂样品0.4 g（精确至0.000 2 g）置于一具塞玻璃瓶中，用移液管准确加入10 mL内标溶液，摇匀，过滤。

（4）测定

在上述气相色谱条件下，待基线稳定后，连续注入数针标准样品溶液，当相邻2针峰面积差小于1.5%时，按照标准溶液、试样溶液、试样溶液、标准溶液的顺序进样。

1.4  计算

将测得的2针试样溶液以及试样前后2针标准溶液中戊唑醇、咪鲜胺与内标物的峰面积比分别进行平均。试样中戊唑醇、咪鲜胺的质量分数w_i（%）按下式计算。

式中：r_i为标样溶液中被测物质与内标物峰面积比的平均值，r₂为标样溶液中被测物质与内标物峰面积比的平均值，m_i为标样的质量（g），m₂为试样的质量（g），w_b为标样中被测物质的质量分数（%）。

2  结果与讨论

2.1  仪器升温条件的选择

在不同温度条件下对标准溶液进行气相色谱分析，经过对照，选择柱温220℃，保持10 min，以10℃/min的速度程序升温至280℃。此时标样和内标峰均分离良好，峰型好，保留时间也比较适宜。

2.2  内标物的选择

对邻苯二甲酸二环己酯、邻苯二甲酸二戊酯、磷酸三丁酯、正二十烷、正二十四烷等内标物进行比对分析，在上述仪器条件下，得到各物质的保留时间（表1）。

表1  各种内标物的保留时间

邻苯二甲酸酯二环己酯与戊唑醇和咪鲜胺都能完全分离，并且保留时间也比较适宜，因此选择邻苯二甲酸酯二环己酯作为内标物质。

2.3  线性相关度的测定

配制一系列不同质量浓度的戊唑醇·咪鲜胺标准溶液，在上述色谱条件下进行峰面积测定，每个质量浓度平行测定2次，取平均值。以戊唑醇或咪鲜胺与内标物的质量浓度比为横坐标，戊唑醇或咪鲜胺与内标物的峰面积比为纵坐标，拟合曲线，求得戊唑醇的线性回归方程为y=0.879 5x-0.003 9，R²=0.999 9；咪鲜胺的线性回归方程为y=0.477 9x+0.000 1，R²=0.999 9。

2.4  方法精密度的测定

从同一戊唑醇·咪鲜胺混剂中称取7份样品，按上述气相色谱条件测定戊唑醇和咪鲜胺的质量分数，求得标准偏差与变异系数，结果表明方法精密度较高（表2）。

表2  戊唑醇·咪鲜胺混剂精密度的测定

2.5  方法准确度的测定

从已知质量浓度的戊唑醇·咪鲜胺混剂中称取7份试样，在每份试样中再加入一定质量浓度的戊唑醇与咪鲜胺表样，在上述色谱条件下测定回收率，结果表明方法准确度较好（表3）。

表3  戊唑醇·咪鲜胺混剂回收率的测定

3  结论

本方法以甲醇为溶剂，邻苯二甲酸二环己酯为内标记物，选用HP-5色谱柱，采用内标法测定戊唑醇·咪鲜胺水乳剂中有效成分含量，该方法具有操作简单、效率高、分离效果好、准确度和精密度高等优点，适用于戊唑醇·咪鲜胺水乳剂中有效成分戊唑醇、咪鲜胺的定性及定量分析。

来源：刘文栋, 蒋莹, 顾春思, 张瑜, 肖湾. 戊唑醇·咪鲜胺水乳剂的气相色谱法分析. 农药, 2019, 58(8): 589-590; 607

作者单位介绍：上海市质量监督检验技术研究院