在国家明令禁止使用的农药中，目前发现有杀虫脒、乙酰甲胺磷被高频检测出。由于明令禁止的农药违法成本较高和原药管制等原因，禁用农药被用来隐性添加概率反而较小。不法厂商为了通过增加农药药效来占领农药市场，便在隐性添加上大做文章，多种隐性农药同时添加，大大增加了执法抽检难度。
为此，依据全国农药执法案和本站多年检测经验汇总出25种高频非法添加农药。
杀螟硫磷、三唑磷、治螟磷、哒螨灵、氯氰菊酯、甲氰菊酯、丁硫克百威、仲丁威、乙酰甲胺磷、氟虫腈、水胺硫磷、高效氯氟氰菊酯、灭多威、毒死蜱、高效氯氰菊酯、吡蚜酮、吡虫啉、啶虫脒、克百威、氯虫苯甲酰胺、喹啉酮、辛硫磷、氟铃脲、溴虫腈、阿维菌素。
根据以上25种禁限用农药理化性质、仪器适应性、检测标准异同、出峰时间相近成分干扰，将其分为高效液相色谱（10种）和气质联用仪（15种）两大部分进行反复实验，得出的试验条件供读者参考。本方法最大的特点是将气质联用仪和高效液相色谱统一起来。
1 实验部分
1.1 液相色谱实验部分
（1）仪器
Agilengt 1260高效液相色谱仪，超声波清洗器。
（2）试剂
吡蚜酮、吡虫啉、啶虫脒、克百威、氯虫苯甲酰胺、喹啉酮、辛硫磷、氟铃脲、溴虫腈、阿维菌素（含量均≥99.0%）等10种农药标准品；甲醇（溶剂）色谱纯；超纯水。
（3）色谱条件选择
甲醇-水体系：梯度；色谱柱：250 mm不锈钢柱；流动相洗脱梯度（表1）。流速1.0 mL/min；柱温25℃；检测波长254 nm；进样量：10 μL。混合标样色谱图及10种标样保留时间（图1），对每个标样按照洗脱条件进行了单独定位，不再附图一一列举。
表1 甲醇-水体系流动相洗脱梯度
图1 10种杀虫剂混合标样液相色谱图（甲醇-水体系）
（4）实验步骤
标样溶液：配制本实验室已备有上述10种农药约0.050 0 g/50 mL甲醇溶液。
将10种标样溶液各取2 mL置于50 mL容量瓶中，配置成混合标样，依据洗脱梯度最终得到混合标样色谱图，并多次进样验证了图谱的重现性。
10种农药保留时间：吡蚜酮3.35 min；吡虫啉4.12 min；啶虫脒4.97 min；克百威9.87 min；氯虫苯甲酰胺16.75 min；喹啉酮17.59 min；辛硫磷29.76 min；氟铃脲32.83 min；溴虫腈33.61 min；阿维菌素44.06 min。
（5）结论
对单个标样洗脱梯度进行定位和定性分析，并逐个确定保留时间。
在液相色谱排查农药隐性成分中，需按照禁限判定条件称量样品，然后比对样品各组分峰和混合标样峰，以出峰时间相同相近判定疑似隐性成分添加，最后再对该疑似组分进行定量分析。
1.2 气质联用实验部分
（1）仪器和条件
安捷7890B－5977A气质联用仪，气相色谱柱：30 m×0.25 mm（i.d.）DV－17MS石英毛细管柱，膜厚0.25 μm（或同等效果的色谱柱）；微量进样器：10 μL；温度：100℃保持2 min，梯度（表2），由于灭多威出峰时间较早，设置溶剂延迟2 min，GC运行梯度（表2）。
表2 15种农药标样GC运行梯度
气体流量（mL/min）：载气（He）1.5；分流比：10∶1；进样体积：10 μL；电离能量：70 eV；离子源温度：230℃；四级杆温度：150℃；辅助通道温度：280℃；扫描模式：全扫描；保留时间（图2）。
（2）试剂
杀螟硫磷、三唑磷、治螟磷、哒螨灵、氯氰菊酯、甲氰菊酯、丁硫克百威、仲丁威、乙酰甲胺磷、氟虫腈、水胺硫磷、高效氯氟氰菊酯、灭多威、毒死蜱、高效氯氰菊酯（含量均≥99%）等15种农药标准品；阿维菌素乳油样品；色谱级丙酮。
（3）实验步骤
称取15种农药标准品各约0.05 g置于同一试剂瓶中，加入50 mL丙酮，充分溶解制成混合标样，用滴管再取该溶液1.5 mL标记样品瓶I；称取0.25 g阿维菌素1#样品置于试剂瓶中，加入50 mL丙酮，充分溶解，用滴管再取该溶液1.5 mL标记样品瓶Ⅱ。样品瓶I和样品瓶Ⅱ出峰情况（图2，图3）。
图2 15种农药标样（样品瓶I）质谱图
图3 阿维菌素农药样品（样品瓶Ⅱ）质谱图
15种农药标样出峰时间：灭多威2.27 min；乙酰甲胺磷5.9 min；仲丁威7.56 min；治螟磷8.42 min；丁硫克百威9.24 min；杀螟硫磷12.61 min；毒死蜱13.19 min；水胺硫磷13.47 min；氟虫腈14.56 min；三唑磷17.79 min；氟氯菊酯20.91 min；甲氰菊酯21.2 min；高效氯氟氰菊酯22.61 min；哒螨灵23.53 min；高效氯氰菊酯24.95 min。
阿维菌素乳油样品查出违禁限农药出峰时间：毒死蜱13.35 min；啶虫脒21.11 min；氯氰菊酯22.66 min。
（4）结论
经过反复条件摸索和梯度调整，得到质谱图。其中灭多威出峰时间较早，溶剂延迟时间由最初的3.00 min改成最后的2.00 min；乙酰甲胺磷响应值较低，实际操作中可以适量增加标准品剂量，单独核对出峰时间查找是否含有该成分。
对比图2和图3（阿维菌素农药样品质谱图）查出样品含有三种禁限用农药毒死蜱、啶虫脒、氯氰菊酯，这是一个典型的非法添加案例。
2 总论
在排查这25种违禁限用农药时，与现有文献不同之处是首先将气质联用仪不能检测的10种农药放在液相色谱进行检测，增加总体排查的可靠性。综合这10种农药液相色谱国标企标分析方法，在流动相选择上用低毒低成本的甲醇而不用乙腈；吸收波长也是通过多次反复试探，最终确定为254 nm；鉴于酸性条件和缓冲磷酸盐可能会导致部分样品分解或出峰异常，本次实验流动相暂不添加任何酸和盐。气质联用仪检测的15种农药做一个整体标样质谱图，用于后期样品精确比对，一旦发现可疑成分，迅速用液相色谱对可疑成分进行定量分析。气质联用-液相色谱联用法。
农药作为控制农作物病虫草鼠等有害生物危害的特殊商品，在促进农业增加产量和农民增收方面发挥重要作用。如果农药的质量不合格或者使用不当，则会导致农产品农药残留超标，人畜中毒，生态环境污染。一个普通的阿维菌素乳油中居然添加了三种禁限用农药，可见非法添加在实际农药生产中的严峻性。为此，研究出这套综合分析方法，目的是通过降低排查成本，达到农药非法添加排查普及效果，从而促进整个农药行业良性发展。
来源：《农药科学与管理》2019年第10期
作者：罗少辉, 路锋, 周爱英, 刘莉苹, 杨水岚, 程冬冬
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